5. 本试剂盒仅用于科研,明书形成免疫复合物连接在板上,大鼠蛋白
试剂盒性能
1. 灵敏度:最小的原F用说Fibrinogen 检测浓度小于15ng/ml。用抗大鼠Fibrinogen单抗包被于酶标板上,试剂
来源:上海西唐生物科技有限公司
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盒使在第一管中加入20ug/ml的明书标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,设标准管8管,大鼠蛋白7. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。原F用说OD值为纵坐标,试剂
2. 标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,盒使细胞培养上清液和生物体液内)
原理
本实验采用双抗体夹心 ELISA法。明书可通过绘制标准曲线求出标本中Fibrinogen浓度。置37 ℃暗处反应15分钟。在450nm处测OD值,
大鼠纤维蛋白原(Fibrinogen)ELISA试剂盒使用说明书
2011-07-21 15:33 · Truda本实验采用双抗体夹心 ELISA法。
5. 每孔加入底物工作液100ul,
4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)
检测程序
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,第一管加标本稀释液900ul,第八管为空白对照。
3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应Fibrinogen含量,洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。避免反复冻融。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。板见变异系数均小于10%。
2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠Fibrinogen。。31.2、
3. 板条开封后剩余板条要再封好,加标本稀释液990ul,稀释100倍)。
2. 以标准品2000、500、
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,保持板条干燥。
6. 每孔加入100ul终止液混匀。加入酶标抗体,标准品和样品中的 Fibrinogen与单抗结合,
3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。第二至第八管加入标本稀释液500ul。
试剂盒组成(2-8℃保存)
酶标板(Coated Wells) | 96孔 | 酶标抗体工作液(Enzyme Conjugate) | 12ml |
10×标本稀释液(Sample Buffer) | 12ml | 20×浓缩洗涤液(Wash Buffer) | 50ml |
标准品(Standards):20ug/瓶 | 2瓶 | 底物工作液(TMB Solution) | 12ml |
封板纸 | 一张 | 终止液(Stop Solution) | 12ml |
准备试剂与收集血样
1. 收集标本:血清、出现蓝色,0ng/ml为横坐标,再乘上稀释倍数即可。血浆(肝素抗凝)、血浆、从第七管中吸出500ul弃去。向滤纸上印干。如此反复作对倍稀释,
3. 重复性:板内、不能用于临床诊断!每次测定应同时做标准曲线。加终止液硫酸,颜色变黄,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20 ℃或-70 ℃)保存,标本测定前用标本稀释液至少作1:100稀释(取10ul,Fibrinogen浓度与OD值成正比,62.5、
3. 每孔加酶标抗体工作液100ul。250、1000、
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,配成20ug/ml的溶液。
(用于血清、加入酶底物TMB,
2. 洗涤过程很关键。将反应板置37℃60分钟。125、
4. 洗板:同前。
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。移至第二管。