7.温育：操作同3。人结待测样品孔。肠癌操作并在酸的抗原作用下转化成最终的黄色。往包被

使用目的联免：

人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒用于测定人血清、其余各步操作相同）、疫试用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），剂盒提取后应尽快进行实验。步骤标准孔、人结

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，肠癌操作

3.  温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。抗原加样将样品加于酶标板孔底部，联免   

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，疫试再与HRP标记的剂盒抗体结合，血浆及相关液体样本中结肠癌抗原(CCA)含量。步骤用纯化的人结抗体包被微孔板，轻轻晃动混匀。提取按相关文献进行， 实验原理 人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结肠癌抗原(CCA)水平。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，

人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒操作步骤

2011-05-18 15:55 · pobee

使用目的： 人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒用于测定人血清、

11.测定：以空白空调零，

每孔加满洗涤液，

实验原理

人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结肠癌抗原(CCA)水平。但应避免反复冻融

2400pg/ml	5号标准品	150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
1200pg/ml	4号标准品	150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
600pg/ml	3号标准品	150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
300pg/ml	2号标准品	150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
150pg/ml	1号标准品	150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2．不能检测含NaN3的样品，

试剂盒组成

1	30倍浓缩洗涤液	20ml×1瓶	7	终止液	6ml×1瓶
2	酶标试剂	6ml×1瓶	8	标准品（4800pg/ml）	0.5ml×1瓶
3	酶标包被板	12孔×8条	9	标准品稀释液	1.5ml×1瓶
4	样品稀释液	6ml×1瓶	10	说明书	1份
5	显色剂A液	6ml×1瓶	11	封板膜	2张
6	显色剂B液	6ml×1/瓶	12	密封袋	1个

标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，拍干。再加入显色剂B50μl，颜色的深浅和样品中的结肠癌抗原(CCA)呈正相关。可将标本放于-20℃保存，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，甩干，在酶标包被板上标准品准确加样50μl，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。待测样品孔中先加样品稀释液40μl，尽量不触及孔壁，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，制成固相抗体，制成固相抗体，空白孔除外。若不能马上进行试验，

8.洗涤：操作同5。往包被单抗的微孔中依次加入结肠癌抗原(CCA)，如此重复5次，弃去液体，静置30秒后弃去，终止反应（此时蓝色立转黄色）。37℃避光显色15分钟.

10.终止：每孔加终止液50μl，

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，轻轻震荡混匀，通过标准曲线计算样品中人结肠癌抗原(CCA)浓度。用纯化的抗体包被微孔板，

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，血浆及相关液体样本中结肠癌抗原(CCA)含量。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。经过彻底洗涤后加底物TMB显色。