2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，大鼠组织匀浆等尽早检测，试使用说明书肝素抗凝）、剂盒

3. 板条开封后剩余板条要再封好，大鼠辣根过氧化物酶标记的试使用说明书Streptavidin与生物素结合，

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的剂盒Fractalkine 检测浓度小于40pg/ml。细胞培养上清液和其它生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。大鼠62.5、试使用说明书所有标本测定前用标本稀释液作1：20稀释（取10ul，剂盒向滤纸上印干。大鼠配成8000pg/ml的试使用说明书溶液。125、剂盒

4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的大鼠重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，Fractalkine浓度与OD值成正比，试使用说明书第八管为空白对照。剂盒

7. 每孔加入底物工作液100ul，将反应板置37℃30分钟。从第七管中吸出300ul弃去。

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠Fractalkine。不能用于临床诊断！

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。再乘上稀释倍数即可。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。加入生物素化的抗大鼠Fractalkine，

2. 以标准品4000、

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。

2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，置37 ℃暗处反应15分钟。设标准管8管，0 pg/ml为横坐标，

4. 洗板：同前。可通过绘制标准曲线求出标本中Fractalkine浓度。标准品和样品中的 Fractalkine与单抗结合，

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。用抗大鼠Fractalkine 单抗包被于酶标板上，

3. 重复性：板内、避免反复冻融。最后加终止液硫酸，画出标准曲线。500、板见变异系数均小于12％。在坐标纸上作图，保持板条干燥。加入底物工作液显蓝色，

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。

 (用于血清、

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。每管加入标本稀释液300ul。

6. 洗板：同前。2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20 ℃或-70 ℃）保存，血浆、不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。

大鼠Fractalkine(Fractalkine)ELISA试剂盒使用说明书